Principais
- Jensen Ackles como Dean Winchester
- Jared Padalecki como Sam Winchester
Secundários
- Jeffrey Dean Morgan como John Eric Winchester (2005-2006)
- Jim Beaver como Bobby (2006-presente)
- Samantha Smith como Mary Winchester (2005-2009)
- Adrianne Palicki como Jessica Moore (2005-2009)
- Misha Collins como Castiel (2008-presente)
- Fredric Lehne Como Azazel (2005-2006)
- Katie Cassidy (2007-2008) e Genevieve Cortese (2008-2009) como Ruby
- Sterling K. Brown como Gordon Walker (2006-2007)
- Lauren Cohan como Bela (2007-2008)
- Samantha Ferris como Ellen Harvelle (2006-2009)
- Alona Tal como Jo Harvelle (2006-2009)
- Jeannette Sousa (2006), Ona Grauer (2007) e Sandra McCoy (2007) como Demônio da Encruzilhada
- Chad Lindberg como Ash (2006-2007)
- Charles Malik Whitfield como Victor Henricksen (2007-2008)
- Nicki Aycox (2005-2006) e Rachel Miner (2009-presente) como Meg Masters
- Colin Ford como o Sam jovem (2007-2009)
- Ridge Canipe como o Dean jovem (2006-2007)
- Brock Kelly como o Dean adolescente (2009)
- Rachel Pattee (2008), Sierra McCormick (2008) e Katherine Boecher (2009) como Lilith
- Robert Wisdom como Uriel (2008-2009)
- Julie McNiven como Anna (2008-presente)
- Mark Rolston (2008) e Christopher Heyerdahl (2009) como Alastair
- Traci Dinwiddie como Pamela Barnes (2008-2009)
- Kurt Fuller como Zacharias (2009-presente)
- Colin Lawrence como Rafael (2009-presente)
- Richard Speight Jr. como Brincalhão/Gabriel (2007-presente)
- Mark Pellegrino como Lucifer (2009-presente)
- Rob Benedict como Chuck Shurley (2009-presente)
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